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mRNA全新轉(zhuǎn)錄Buffer&核苷酸助力IVT性能提升

mRNA理論上可以表達任何蛋白質(zhì)，被稱為“萬能鑰匙”，因此 mRNA技術(shù)在生物制藥領(lǐng)域極具潛力和熱度。在mRNA生產(chǎn)流程中，通過體外轉(zhuǎn)錄（In Vitro Transcription，IVT）以線性DNA為模板來制備mRNA，是mRNA工藝中的重要一環(huán)。體外轉(zhuǎn)錄合成（IVT）的過程需要多個酶和核苷酸等物質(zhì)的參與，是一個較為復雜的酶催化反應，為了保證IVT的工藝穩(wěn)定，通常需要根據(jù)工藝的規(guī)模設(shè)計不同反應體系以達到最優(yōu)條件來實現(xiàn)產(chǎn)能的穩(wěn)步提升。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，通過不同類型的修飾核苷酸替換和適當?shù)逆V離子濃度，能抑制dsRNA的合成[1]，鎂、鈉離子，游離核苷酸NTPs以及不同類型的離子對于IVT反應saRNA產(chǎn)量也有一定的影響[2]。另外，離子類型對于IVT反應產(chǎn)量具有非常重要的作用[3]。因此，為了獲得更優(yōu)的IVT反應體系，翌圣生物摸索了多種反應條件和體系，來提升IVT產(chǎn)物性能，不僅可以一定程度地提高產(chǎn)量，同時降低dsRNA的產(chǎn)生以及提高RNA的完整度?，F(xiàn)推出全新的10×Transcription Buffer，同時搭配性能優(yōu)越的Tris鹽型核苷酸產(chǎn)品，助力mRNA藥物快速開發(fā)。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱
10670ES	10×Transcription Buffer 2 GMP-grade
10652ES	ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM)
10653ES	CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)
10654ES	UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)
10655ES	GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)

產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 提高IVT產(chǎn)量

圖1. 不同鎂離子鹽型對IVT產(chǎn)量影響

圖2.不同NTP鹽型對IVT產(chǎn)量影響

經(jīng)優(yōu)化的TranscriptionBuffer（10670ES）能提升IVT產(chǎn)量
經(jīng)優(yōu)化的Transcription Buffer（10670ES）搭配Tris-NTP能顯著提升IVT產(chǎn)量

2. 抑制dsRNA合成

同等條件下，分別使用Tris鹽和Na鹽的NTP進行IVT 反應，采用Dot blot 的方法對dsRNA 進行檢測。

圖3.不同鹽型NTP對IVT副產(chǎn)物dsRNA的影響

Tris-NTP制備的RNA中dsRNA含量明顯降低。

產(chǎn)品特色

符合ISO 13485體系
通過產(chǎn)品穩(wěn)定性驗證
符合GMP指南
AOF生產(chǎn)過程和原料(TSE & BSE)
大規(guī)模生產(chǎn)能力

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
10670ES	10×Transcription Buffer 2 GMP-grade	1/10/25/500mL
10671ES	T7 RNA Polymerase Mix GMP-grade	40/400µL，10/400 mL
10624ES	T7 RNA Polymerase GMP-grade (50 U/μL)	5000/50000U
10625ES	T7 RNA Polymerase GMP-grade (250 U/μL)	10/100/2500KU，100 MU
10652ES	ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	1/5/25/500mL
10653ES	CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	1/5/25/500mL
10654ES	UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	1/5/25/500mL
10655ES	GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	1/5/25/500mL
10656ES	Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	20/100μL，1/5mL
10657ES	N1-Me-Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM)	20/100μL，1/5/25/500mL

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[1].Triana-Alonso,F.J., Dabrowski,M., Wadzack,J. and Nierhaus,K.H. (1995) Self-coded 3'-extension of run-off transcripts produces aberrant products during in vitro transcription with T7 RNA polymerase. J. Biol. Chem., 270, 6298–6307

[2].Konarska,M.M. and Sharp,P.A. (1989) Replication of RNA by the DNA-dependent RNA polymerase of phage T7. Cell, 57, 423–431.

[3]Samnuan K , Blakney A K , Mckay P F , et al. Design-of-Experiments In Vitro Transcription Yield Optimization of Self-Amplifying RNA. 2021.

400-6111-883

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